elisa試劑盒組成及常見分類有哪些ELISA試劑盒的組成
ELISA試劑盒的核心組件包括以下部分:
包被板(微孔板)?
96孔或384孔聚苯乙烯板,預(yù)包被抗原或抗體,用于捕獲目標(biāo)分子?。
部分試劑盒使用濾膜或特殊涂層增強(qiáng)吸附性能。
標(biāo)準(zhǔn)品?
已知濃度的目標(biāo)分子(如抗原/抗體),用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?。
需避免反復(fù)凍融,稀釋時(shí)使用低吸附EP管?。
檢測抗體?
酶標(biāo)記抗體(如HRP/ALP標(biāo)記),通過催化底物顯色實(shí)現(xiàn)信號放大?。
部分試劑盒提供生物素化抗體+鏈霉親和素-酶復(fù)合物(雙抗夾心法)?。
酶底物?
常用TMB(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)或OPD(鄰苯二胺),顯色后通過酶標(biāo)儀讀數(shù)?。
緩沖液與洗滌液?
封閉液(如BSA)減少非特異性結(jié)合,洗滌液(含Tween-20)清除未結(jié)合物質(zhì)?。
終止液?
硫酸或鹽酸溶液,終止顯色反應(yīng)并穩(wěn)定信號?。
ELISA試劑盒的常見分類
按檢測目標(biāo)分類?
抗原檢測?:包被抗體捕獲樣本中的抗原,適用于病原體或細(xì)胞因子檢測?。
抗體檢測?:包被抗原捕獲樣本中的抗體,用于血清學(xué)診斷。
按方法學(xué)分類?
雙抗夾心法?:高特異性,需兩種抗體(捕獲+檢測),適用于大分子抗原?。
競爭法?:樣本抗原與標(biāo)記抗原競爭結(jié)合抗體,適用于小分子。
間接法?:檢測一抗后加酶標(biāo)二抗,靈敏度高但易受干擾?。
按種屬分類?
人、小鼠、大鼠、兔等種屬特異性試劑盒,避免交叉反應(yīng)?。
特殊類型?
磷酸化特異性ELISA?:檢測蛋白磷酸化狀態(tài)?。
多重檢測試劑盒?:可同時(shí)分析多種目標(biāo)分子(如細(xì)胞因子組合)?。
注意事項(xiàng)
試劑盒需2-8℃保存,避免反復(fù)凍融?。
不同批次試劑禁止混用,標(biāo)準(zhǔn)品需現(xiàn)配現(xiàn)用?。
注意:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒
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